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來源：

International Journal of Nanomedicine

收錄：Dovepress

轉(zhuǎn)載：CATIZ人畜共患病防控科技創(chuàng)新院

2025年1月8日，Xintao Gao等作為原著作者，在《Dovepress》發(fā)表了題為“A Ferritin-Based Eg95 Nanoparticle Vaccine Adjuvanted with pCpG Eliciting Robust Immune Responses Against Cystic Echinococcosis in Mice Model”的研究論文。

該研究揭示鐵蛋白-CpG 雜交是一種很有前途的聯(lián)合佐劑，可以升級(jí)傳統(tǒng)的 Quil-A，這種基于聯(lián)合佐劑的納米疫苗具有良好的潛力，可以作為實(shí)際 CE 控制的商業(yè)疫苗的替代品。

 納米疫苗誘導(dǎo)了有效且持久的 Eg95 特異性體液和細(xì)胞免疫反應(yīng)，以及由較高比例的 IgG2a/IgG1 和 IFN-γ/IL-4 支持的保護(hù)性免疫相關(guān) Th1 極化。同時(shí)，這種納米疫苗表現(xiàn)出良好的安全性和經(jīng)濟(jì)性。

1.Eg95s-Fe 納米顆粒的表達(dá)及測(cè)定

使用大腸桿菌 BL21 （DE3） 表達(dá)系統(tǒng)制備 Eg95s 納米顆?？乖?。

圖 3基于納米顆粒的抗原設(shè)計(jì)和表征。

2.MTS 分析的體外細(xì)胞毒性

將 RAW 264.7 、 MDBK 和 BHK-21 細(xì)胞暴露于不同濃度的佐劑 （增效劑和遞送系統(tǒng)） 24 h。使用 MTS 測(cè)定法測(cè)定毒性特征。

圖 4MTS 測(cè)定佐劑在 RAW264.7 、 MDBK 和 BHK-21 細(xì)胞中的細(xì)胞毒性。

3.血液生化檢測(cè)

收集 12 w.p.i. 的血清樣品用于生化檢測(cè)。體內(nèi)額外的安全性評(píng)估表明，三組過量免疫的小鼠都活著健康，即使用 10 倍劑量的納米疫苗免疫的小鼠血清生化指標(biāo)也正常（補(bǔ)充表 1）。

圖 5基于納米顆粒的疫苗體內(nèi)安全性評(píng)價(jià)。

4.組織病理學(xué)

從不同組的動(dòng)物中收集組織樣本并進(jìn)行組織病理學(xué)分析。如圖 5E 所示，各組小鼠的心臟、肝臟、脾臟、肺、腎或肌肉均未觀察到明顯的病變或病理異常?？偟膩碚f，這些發(fā)現(xiàn)表明，在正常免疫劑量下，pCPG 佐劑納米疫苗對(duì)小鼠沒有毒理學(xué)作用。

5.聯(lián)合佐劑 （Fe +pCpG） 增強(qiáng)了 Eg95 特異性總血清 IgG 抗體反應(yīng)

如圖 6A 所示，在特定時(shí)間點(diǎn)從所有測(cè)試組中收集的接種疫苗小鼠的血樣中分離血清，并量化抗體反應(yīng)。

6.聯(lián)合佐劑促進(jìn)了抗原特異性 IgG 亞類和 Th1 極化

考慮到佐劑可能會(huì)改變抗體亞類反應(yīng)，并且這種影響在具有不同作用方式的佐劑之間可能有所不同，因此測(cè)量了血清中四種 IgG 同種型的滴度（圖 6C-F）。

圖 6疫苗特異性的體液免疫反應(yīng)

7.聯(lián)合佐劑增強(qiáng)了細(xì)胞免疫反應(yīng)并增強(qiáng)了 Th1 極化

為了評(píng)估佐劑對(duì)免疫激活和偏倚的影響，用 Eg95 抗原刺激從免疫小鼠中分離的脾細(xì)胞，并測(cè)定上清液中顆粒酶 B 和細(xì)胞因子的水平（圖 7A）。

8.聯(lián)合輔助劑增強(qiáng)脾細(xì)胞的 eg95 特異性增殖反應(yīng)

使用 MTS 測(cè)定響應(yīng) Eg95 探索佐劑、抗原特異性 T 細(xì)胞活化和體內(nèi)增殖的潛在潛在機(jī)制。